鸡新城疫的症状 鸡新城疫的实验室诊断

鸡新城疫是由病毒引起的一种急性败血性传染病。俗称“鸡瘟”，即所谓亚洲鸡瘟。本病一年四季均可发生，尤以寒冷和气候多变季节多发。各种日龄的鸡均能感染，20日龄—60日龄鸡最易感，死亡率也高。主要特征是呼吸困难，神经机能紊乱，粘膜和浆膜出血和坏死。下面一起来具体了解一下：鸡新城疫的症状 鸡新城疫的实验室诊断。

1、临床症状

患鸡体温升高到43～44℃，精神沉郁或闭眼嗜睡，病鸡腹泻呈黄白色或绿色，有时带血，常摇头、暖气，发出“咯咯”声，口和鼻中有多量黏液，嗉囊内积液，病程稍长或呈慢性经过时，常有腿、翅麻痹或头、颈歪斜等神经症状。剖检特征病变是腺胃的乳头突起部或黏膜上有点状或斑状出血，有时形成溃疡，尤其在腺胃与食道交界部更为明显。肌胃黏膜上有点状或不正形的出血斑点。肠道、尤其是盲肠扁桃体和小肠黏膜（迥言瓣部）以及直肠黏膜上出血和不同大小界限清楚、出血性纤维素坏死伪膜，其他各部位如心、腹部脂肪及喉头、气管等处都有出血斑点。

2、病毒分离

材料应采自早期病例，慢性病例不适宜于分离禽病毒，病鸡扑杀后应用无菌手术采取脾、肾、肝、肺（通常有较高的病毒滴度），脑（病毒的存在时间较其他组织长）或骨髓（最不易被细菌污染）等组织。生前可用灭菌棉拭子获取呼吸道或泄殖腔分泌物。将棉拭子浸出液或经研磨的组织悬液制成1：5～10乳剂，每毫升加青、链霉素各1000～2000单位，以抑制可能污染的细菌，置冰箱中作用2～4小时，然后离心沉淀，取其上清液作为接种材料。

2.1鸡胚接种

常用9～10日龄的鸡胚，每份病料至少注入5个鸡胚，接种于绒毛尿囊膜或尿囊内。照蛋，划出气室位置，在鸡胚胎面观看胚胎活动，选择无大血管处标一记号。在气室顶部和标记处用碘酊和酒精消毒，并各钻一小孑L。用较干的碘酊棉球涂布小孔。用1　mL注射器吸取上述处理过的材料，插入小孑L内约3mm，缓缓注入0.1～0.2mL，拔出针头。用融化石腊封口，在蛋壳上标明日期。置37℃温箱培养，每天照蛋二次，至全部或大部分鸡胚发生死亡为止(24h内死亡的胚弃之)。将死胚收藏于4℃冰箱内，气室向上，6～24h获尿囊液。

收获尿囊液时，以碘酊涂擦气室和气室附近的蛋壳，用灭菌摄子将气室处蛋壳敲破，剥去蛋壳，用另一灭菌小镊子剥去蛋壳膜，并撕破绒尿膜，暴露出清晰的尿囊液（混浊者已污染，应弃去不收），以镊子将胚胎和胚膜压向一边，吸取尿囊液于灭菌瓶中，并加标签。

用透明而无菌者作血凝反应，可在96孔微孑L板上进行，也可将尿囊液一滴与1%～2%鸡红细胞悬液一滴在一块白瓷板上相混和，如发生红细胞凝集，即用已知抗鸡新城疫血清作血球凝集抑制试验(　HI)，出现抑制反应，便可得到确诊。

2.2组织培养（细胞培养）

鸡新城疫病毒能在禽源原代细胞，一些哺乳动物的原代细胞和细胞系中生长繁殖，因此也可用细胞培养的方法来分离病毒。最常用的是在玻璃和塑料容器内长成单层的鸡胚成纤维细胞。操作时可将待检液作一系列十倍比的稀释，分别注入到鸡胚成纤维细胞的培养管中，24～48h出现细胞病变（细胞圆缩颗粒化，拉长呈蜘蛛网或干枝梅样），取培养液作HA和HI试验，鉴定病毒。也可在细胞培养中用已知血清进行中和试验，作出鉴定结果，如将待检材料注入鸡胚成纤维细胞的平皿培养中。新城疫强毒通常出现大而透明或大而红色蚀斑(2～4mm)。根据蚀斑形成单位可测定病毒浓度。

3、血清学检查

由于循环抗体产生后，病毒可从寄主的组织中迅带消失，所以慢性病例难于分离病毒，应通过特异抗体的检查来间接诊断此病。通常中和抗体较血凝抑制(　HI)抗体维持时间要长些，但中和试验较费时花钱，而HI试验能在短时间内作大量测定，检出的抗体滴度一般相当于中和滴度。因此常用HI试验来检查抗体。抗体滴度于感染后5～7d开始上升，15～20d可达高峰且能维持较长时间，受强毒感染而耐过的鸡在体内产生极高的抗体水平，滴度高达11(　Log2)以上。在感染群内出现高抗体的数量随鸡群原有的抗体水平而异，与鸡的年龄也有关系，平均可达30%，在只有少数出现症状，不断发生死亡的鸡群中，可对活鸡进行抗体检测。如有较多高抗体鸡的出现，说明鸡群已受过新城疫野毒感染。免疫过较长时间的鸡群持续保持高水平的抗体，可能是隐性感染或慢性感染的结果。

新城疫的实验室诊断

 临床诊断：
1.精神萎靡，采食减少，呼吸困难，饮水增多。常有“咕噜”声，排黄绿色稀便；
2.发病后部分鸡出现转脖、望星、站立不稳或卧地不起等神经症状，多见于发病的雏鸡和育成鸡；
3.产蛋鸡产蛋减少或停产，软皮蛋、褪色蛋、沙壳蛋、畸形蛋增多，卵泡变形、卵泡血管充血、出血。
4.腺胃乳头出血，肠道表现有枣核状紫红色出血、坏死灶。喉头和气管黏膜充血、出血，有粘液；
5.血凝抑制抗体（HI）显著升高或两极分离，离散度增大；
6.注意新城疫与禽流感、传染性支气管炎、传染性喉气管炎、肾传支等的并发和继发感染情况，在诊断和防治鸡新城疫的同时，应特别留意与这些疾病的鉴别诊断与联合防治，特别是联合免疫工作；
7.应注意非典型新城疫患病鸡群和高免鸡群中由于漏免而存在的易感个体在存储和散播新城疫病毒过程中的作用，重视防治非典型新城疫及避免漏免得情况发生。
实验室诊断：在国际贸易中，尚无指定诊断方法。替代诊断方法为血凝抑制试验。
病原检查：①病毒培养鉴定：样品经处理后，接种9～10日龄SPF鸡胚，37℃孵育4～7天，收集尿囊液做HA试验测定效价，用特异抗血清（鸡抗血清）或I试验判定ND病毒存在。②毒力测定：1日龄雏鸡脑内接种致病指数（ICPI）测定、6周龄鸡静脉内接种致病指数（IVPI）测定、鸡胚平均死亡时间（MDT）测定。
血清学试验：病毒血凝试验（HA）、病毒血凝抑制试验（HI）、酶联免疫吸附试验(ELISA，用于现场诊断、流行病学调查和口岸进出境鸡检疫的筛检）。
样品采集：用于病毒分离，可从病死或濒死禽采集脑、肺、脾、肝、心、肾、肠（包括内容物）或口鼻拭子，除肠内容物需单独处理外，上述样品可单独采集或者混合。或从活禽采集气管和泄殖腔拭子，雏禽或珍禽采集拭子易造成损伤，可收集新鲜粪便代替。上述样品立即送实验室处理或于4℃保存待检（不超过4天）或一30℃保存待检。
用于血清学试验的样品，一般采集血清。