肉牛传染性鼻气管炎的活体症状、实验室检验及其对策

肉牛传染性鼻气管炎是由于感染疱疹病毒而导致的一种病毒病,通常在气候寒冷的季节容易发生。该病会导致育肥肉牛生长和增重缓慢,母牛泌乳量显著减少,甚至停止泌乳,种公牛感染后会导致精液带毒,严重损害养牛业的经济效益。现通过对该病的活体症状、实验室检验进行分析。下面具体来了解一下：肉牛传染性鼻气管炎的活体症状、实验室检验及其对策。

1、发病机制

疮疹病毒的典型特征是泛嗜性，能够使多种组织器官发生病变，表现出多种不同的临床症状。通过鼻腔感染的病毒，先是附着在上呼吸道和扁桃体黏膜上大量繁殖，随着滴度的不断升高会逐渐蔓延至结膜，并经由神经轴突到达三叉神经节，导致结膜炎和脑炎。通过生殖系统感染的病毒，附着在阴道或包皮黏膜内不断繁殖，使其发生病变，接着会扩散到荐神经节，并在该处潜伏下来。该病的基本特征是持续感染和潜伏感染。

一般来说，病毒会持续存在于感染牛的上呼吸道、生殖道上皮组织以及神经节内，甚至能够持续终生，尤其是中和抗体无法作用于潜伏病毒，在发生分娩、运输等应激因素，以及具有免疫抑制作用的激素（如促肾上腺皮质激素、地塞米松等）能够促使处于潜伏感染状态的病毒被激活，引起间歇性排毒，从而导致带毒牛再次成为该病的传染源。

2、活体症状

呼吸系型。急性感染时可导致病毒侵入到整个呼吸道，但只可轻度感染消化道。发病初期，病牛体温能够升高超过40℃，精神非常萎靡，食欲废绝，有大量的黏液脓性分泌物从鼻腔中流出，鼻黏膜明显充血，形成浅溃疡。鼻窦以及鼻镜由于组织严重发炎，导致鼻黏膜逐渐出现坏死，呼出的气体中往往散发恶臭味。呼吸道往往由于被炎性渗出物阻塞而引起呼吸困难，呈现张口呼吸，呼吸浅且快，一般还伴有疼痛性咳嗽。如果炎症扩散到眼部，就会引起结膜角膜炎。

生殖道感染型。发病初期，病牛稍微发热，精神萎靡，停止采食，经常排尿，并伴有疼痛感，严重时往往会将尾巴向上竖起，不断摆动，烦躁不安。母牛阴门发生水肿，有大量黏液从阴门下联合处呈线条状流出，导致周围皮肤被污染。阴道充血、发炎，且底面上存在大量黏稠状的黏液性分泌物，但没有臭味。阴门黏膜上存在大量白色的小结节，之后逐渐发展成脓疱，随着脓疱的逐渐增多，会相互发生融合，形成一个较大面积的灰白色坏死膜，将坏死膜擦去或者坏死膜发生脱落，会形成一个红色的创面，随着病程的进展，会逐渐在阴道前庭以及整个阴道壁都出现该症状。

3、实验室检验

样品的收集和处理。在病牛感染早期，根据其表现出的临床症状选择在相应部位采取病料，都要悬浮在运输培养基，即添加有2%犊牛血清以及适量抗生素的组织培养液，放在4℃下储存，并立即运送到实验室。运送到实验室的样品，在运输培养基中用拭子充足搅动，促使洗脱病毒，接着在室温条件下放置30min，然后将拭子取出，以1500r/min的速度进行10min离心，取上清液用于分离病毒。需要注意的是，从精液中分离病毒时，要对其进行特殊处理，这是由于精液中混杂能够毒害细胞或者抑制病毒增殖的酶以及其他因子。

病毒分离。病毒可使用多种细胞分离，如原代或者次代牛睾丸、肺或者肾细胞都较适宜。选用24孔塑料培养板，在每孔需添加100～200μL细胞培养物上清液，经过1h吸附将液体倾去，接着添加维持液。每天对细胞病变进行观察，通常在3天之后会出现CPE。细胞发生的典型变化是逐渐圆缩，并聚集形成葡萄样的群落，并在单层细胞上出现空洞，有时还能够看到有多个细胞核的巨大细胞。如果经过7天依旧没有出现CPE，则要再进行1次盲传，然后多次冻融培养物后进行离心，取其上清液在新的单层细胞上接种用于进一步分离病毒。为鉴定引起细胞发生病变的病毒是否为感染疱疹病毒，还必须取细胞培养的上清液同单特异感染疱疹病毒抗血清或者单克隆抗体进行中和试验。

核酸检测。主要是指DNA-DNA杂交以及聚合酶链反应(PCR)。一般来说，PCR的灵敏性要高于病毒分离，其阳性检出率能够比病毒分离提高5倍，甚至能够检出3个分子的病毒。

结果解释。在肉牛体内分离到感染疱疹病毒并不能说明是由该病毒引发疾病，这是由于检出的病毒可能是受到应激而被激活的潜伏病毒，因此只有对多头肉牛就进行检查，并结合血清学检查抗体阳转或者感染疱疹病毒抗体滴度升高4倍或者更高，通过实验室诊断才能够确诊。收集鼻拭子的牛只要间隔2～3周进行2次采血，且双份血清样品要确保进行同一个血清学实验。

4、对策

引种前必须进行血清学检测，确保将疑似阳性或者阳性牛淘汰。牛到场后，必须经过一段时间的隔离饲养才能够正式进入生产区，对于表现出临床症状的要马上进行扑杀。牛舍间必须采取相应的消毒，并在牛群饲养过程要定期进行血清学监测，已将阳性感染牛及时淘汰。只要牛场发生该病，要立即进行封锁、检疫，并对病牛或者感染牛进行扑杀，同时全面消毒牛舍。

临诊症状
自然感染潜伏期一般为4-6天，人工感染(气管内、鼻内、阴道滴注接种)时，潜伏期可缩短至18-72小时，可表现以下临诊类型：
(一)鼻气管炎　最常见的症状，有轻有重。病初高热(40-42℃)，精神萎顿，厌食，流泪，流涎，流粘脓性鼻液。母牛乳产量突然下降。鼻粘膜高度充血，呈火红色，并出现浅的、粘膜坏死。呼吸高度困难，呼出气体恶臭，咳嗽不常见。一般经10-14天左右症状消失。
(二)传染性脓疱性阴道炎　病初轻度发热，食欲无影响，产奶量无明显改变。动物表现不安，频尿，排尿时因疼痛而尾部高举。外阴和阴道粘膜充血潮红，有时粘膜上面散在有灰黄色、粟粒大的脓疱，阴道内见有多量的粘脓性分泌物。重症病例，阴道粘膜被覆伪膜，并见有溃疡。孕牛一般不发生流产。病程约2周左右。
(三)传染性龟头包皮炎　龟头、包皮、阴茎等充血，有时可见阴茎弯曲或形成溃疡等。多数病例见有精囊腺变性、坏死。通常在出现病变后一周开始痊愈，彻底痊愈需两周左右。若为种公牛，患病后3-4月间，失去配种能力，但可成为传染源，应及时淘汰。
(四)角膜结膜炎　多与上呼吸道炎症合并发生，病初由于眼睑水肿和眼结膜高度充血，流泪，角膜轻度混浊，一般无溃疡，无明显的全身反应。重症病例，可见眼结膜形成灰黄色针头大颗粒，致使眼睑粘着和眼结膜外翻。眼、鼻流浆性或脓性分泌物。
(五)流产　一般见于初胎青年母牛怀孕期的任何阶段，有时亦见于经产牛。常于怀孕的第5-8个月发生流产，多无前驱症状，约有50%流产牛见有胎衣滞留，流产胎儿不见有特征性肉眼病变。
(六)肠炎　生后2-3周的犊牛感染不娠妊的原因。
上述症状往往不同程度的同时存在，很少单独发生。

 发病机理及病理变化
病毒常常经上呼吸道粘膜、生殖道粘膜侵入，还可经眼结膜上皮和软壳蜱侵入，是否经口腔感染仍未证实。经上呼吸道入侵的病毒沿粘膜、神经纤维、淋巴管扩散到邻近部位引起上呼吸道炎症、结膜炎。虽然血液的细胞成分在病毒复制、扩散中起重要作用，但很少观察到病毒血症。在病毒血症期间，病毒可侵入呼吸道深部、中枢神经系统、胎犊中，在这些部位引起病变，表现发热性全身性呼吸器官疾病、脑膜脑炎或流产。因条件致病菌易在发炎的粘膜中繁殖，所以有时还可能发生继发性炎症病变如肺炎。
呼吸道病变表现在上呼吸道粘膜的炎症，窦内充满渗出物，粘膜上覆有粘脓性、恶臭的渗出物组成的伪膜。在极少数病例，肺小叶间水肿，一般不发生肺炎。组织学检查，粘膜面可见嗜中性粒细胞浸润，粘膜下层有淋巴细胞、巨噬细胞及浆细胞的浸润。在疾病早期，气管上皮细胞内见有Cowdry A型包涵体。
受侵害的消化道表现颊粘膜、唇、齿龈和硬腭溃疡(与粘膜病不同)，在食道、前胃、真胃也可见同样的病变，肠表现卡他性炎症。组织学检查，上皮细胞空泡变性，派伊尔结(Peyer’s patches)坏死，肝可见坏死灶、核内包涵体。
生殖道型的病例，表现外阴、阴道、宫颈粘膜、包皮、阴茎粘膜的炎症，一些病例可发生子宫内膜炎。组织学检查，见有坏死灶区积聚大量嗜中性白细胞，坏死灶周围组织有淋巴细胞浸润，并能检出包涵体。
流产胎儿体内所见的肉眼变化，几乎是由于死后所致。组织学检查，在肝、肺、脾、胸腺、淋巴结和肾等脏器常发生弥漫性的灶状坏死。由于胎儿物均系死后排出，因机体自溶，包涵体多已消失，很难检出。
患有脑膜脑炎的病例，除脑膜轻度充血外，眼观上无明显变化。组织学检查可见淋巴细胞性脑膜炎及由单核细胞形成血管套为主的病变。