羊猝狙与羊快疫的诊断与免疫

田仕坤

（黑龙江省宝清县八五二农场畜牧科　155620）

羊猝狙与羊快疫都是很急性的疾病，生前诊断很困难，如果羊在健康状态下突然发生急性死亡，且在死后检查又发现第四胃及十二指肠等处有急性炎症，肠内容物中有许多小气泡，肝肿胀而色淡，以及胸腔、腹腔和心包内有积水等病变时，可怀疑是这一类疾病。特别在过去曾发生过本病的地方，更应该怀疑。当然，单凭发病情况和剖检观察还是不够的，因为在常见的羊病中，除各种类型的类似快疫病以外，还有炭疽、巴氏杆菌病，往往容易混淆。结论性的诊断仍需要依靠下述细菌学的检验。

1　产气荚膜梭菌毒素检查

动物肠内容物中经常出现可引起人类气性坏疽的A型产气荚膜梭菌。与动物疾病有关的产气荚膜梭菌有B型（主要为羔羊痢疾病原），C型（主要为羊、犊牛猝狙和仔猪红痢），D型（绵羊肠毒血症病原）及E型（犊牛肠毒血症病原）。

由产气荚膜梭菌引起发病的各种动物，其肠内容物含有致死毒素。细菌纯培养液中也有这些毒素。所以在诊断疾病或作菌型鉴定时，采用这些材料都是可以的。通常诊断的步骤是，先检查肠内容物是否含有致死动物的毒素，方法是取回肠内容物1份，加生理盐水1～4份，充分混合后离心沉淀，取上清液给家兔或小鼠静脉注射，家兔1～2　mL，小鼠0.　2～0.3　mL，如引起急速死亡，证明肠内容物含有毒素，即可进一步以肠内容物或细菌培养物的滤过液加产气荚膜梭菌定型血清作中和试验。方法：取受检液0.7　mL（毒力事先稀释至7～50个小鼠最小致死量的范围），加生理盐水0.3　mL，再以生理盐水补足至1　mL，混合液在室温放置半个小时后，注射。

小鼠：取每管混合液静脉注射2只小鼠，每只用0.　3mL，观察24h，记录其生存和死亡情况。豚鼠：脱去白色豚鼠腹侧的被毛，每管中采取混合液0.2　mL，按管号顺序皮内注射于豚鼠的两侧腹壁，于24h、48h记录其出现坏死与否。

2.肝被膜的触片检查

对死于快疫的家畜，无论是自然病例或者是实验动物，必须作肝触片的检查。腐败梭菌在触片中除了单个及2～3个菌连接的短链以外，还出现线条样的长链，这个特点在诊断上很有价值[养殖网:www.nczfJ.com/]。

3　细菌分离

从肠内容物分离猝狙病原菌：由于C型产气荚膜梭菌在消化道内所产生的毒素被吸收以后，往往不等细菌侵入循环系统而家畜已经中毒死亡，因此必须从肠内容物分离病原菌。分离的方法如下：①取远心沉淀浓缩的肠内容物，经80℃加温30min，接种于厌氧肉肝汤小管增殖细菌后，按一般方法分离菌落；②取远心沉淀浓缩的肠内容物少许，种入厌氧肉肝汤，利用产气荚膜梭菌生长比其他细菌迅速的特性，经37℃增菌培养3～4h即行分离。

从心血分离快疫病原菌：所有的快疫病例都兼有菌血症，血流中的细菌很多，从心血分离细菌的出菌率可达100%。应该指出，送往实验室检查的病理材料必须是新鲜的，因为绵羊的皮毛有着很好的保温作用，在死后不久，肠道内的腐生性细菌，包括腐败梭菌，便穿过失去活力的胃肠组织到达腹腔和实质脏器，用这种死后污染的材料所检查的结果。往往失去诊断意义。因此当家畜死亡后，应尽快用无菌操作采取心血，实质脏器及肌肉等材料各1份，放入30%的甘油溶液中，并采取肠内容物(不少于30mL)，其中加入1%的氯仿作保护剂，尽速送往实验室检查。

4　免疫

猝狙和快疫的死亡率都很高，恢复病例极少，所以通常研究都是在预防阶段。前面已经提到，猝狙死亡的原因是C型产气荚膜梭菌在肠内繁殖产生大量毒素，被吸收后发生肠毒血症的结果。而快疫的死亡，除毒素原因外，还兼有菌血症的关系。对各地采集的快疫菌种研究结果表明，以凝集反应、补体结合反应以及免疫试验等方法，证明从羊分离的快疫菌是有不同类型的。基于上述原因，为获得高效力的生物药品，选用产毒高的C型产气荚膜梭菌和选择免疫原性良好的各型快疫梭菌用于生物药品制造是非常必要的。当然，要获得高效力的菌苗，除要注意选择菌种外，还要有产毒素良好的培养基和制造菌苗的好方法。我国曾研制成功羊猝狙和羊快疫的混合菌苗。该菌苗在流行地区使用后，发病率一般在第五天可显著降低。在疫区多年使用本菌苗后，成功地控制了疫病的暴发流行，收到了良好的防疫效果。曾发现某些地区存在绵羊肠毒血症、羔羊痢疾和羊黑疫等梭菌性疾病，因而又研究出预防羊猝狙、快疫及肠毒血症的三联菌苗和预防羊快疫、羔羊痢疾、猝狙、肠毒血症及黑疫的五连苗。这些多联苗也适用于预防羊猝狙和羊快疫。