东方鲎养殖技术
1.东方鲎养殖池的建造
(1)室内养殖池
一般用水泥池(3.5米X4.5米X1.2米),池底最好铺细沙,这样既适合东方鲎的生活习性,又可避免粗糙池底磨破鲎的外壳,致感染而引起死亡;但铺沙之后,底部残饵、污
一、东方鲎养殖技术
1.东方鲎养殖池的建造
(1)室内养殖池
一般用水泥池(3.5米X4.5米X1.2米),池底最好铺细沙,这样既适合东方鲎的生活习性,又可避免粗糙池底磨破鲎的外壳,致感染而引起死亡;但铺沙之后,底部残饵、污水排除较困难。为保证池水氧气充分,除每天更换部分新水之外,还可采取开启海水龙头击水增氧等措施。
(2)室外土池
可降低成本,场地为沙泥底质,圈养在中上潮带。也可装有进出水的闸门,定期排放,在纳潮进水时,还可带来不少活饵料,在冬季水温降到10℃左右,鲎即埋人泥沙中御寒越冬。
2.投铒
为使东方鲎能耐受多次抽血,保障它的健康,必须投铒喂养。
(1)饵料
①鲜活饵料鲎最喜爱吃如缢蛏、牡蛎、海水小杂鱼等,其中以缢蛏、牡蛎为最佳。
②冷冻饵料
每年在渔汛期,将新鲜饵料存人冷库,以备日常投喂,冷冻饵料必须新鲜,待冰融化后,用海水冲洗干净。若杂鱼个体太大,要切碎投喂。
(2)投饵量
东方鲎的摄食量受水温的影响很大,水温在20—28'E时,食欲最旺盛;水温在20'E以下,摄食量逐渐减少,低于15C时,几乎不摄食,因此,投饵量要根据水温变化和上次投饵残剩多少而定,一般成鲎每天摄食30—40克牡蛎肉或小杂鱼。
3.管理
投入的饵料,一定要用海水冲洗干净。若室内饲养,每日清晨要将残饵排除(可用橡皮管虹吸),再打开阀门排水,换水量为每天30%一50%,夏季每周要洗刷池子,全部换水1次。
东方鲎喜欢温暖,冬季抽血制试剂必须提高水温至2012左右,使鲎能正常摄食,所以必须装置增温设施。
二、东方鲎试剂制备
1.器皿的严格消毒
所有与鲎血细胞接触的玻璃器皿,都要用清洁剂处理,用蒸馏水洗净、烘干。然后浸泡在硅烷化试剂中半小时,用蒸馏水洗净,再用注射用水冲洗1次,经2512干烤半小时后备用。
2.采血
先将鲎体表洗净,然后用1%碘酒70%酒精消毒胸部与腹部联接的关节处,用适宜的注射针头(一般用18G为宜)直接从关节处插至心门,蓝色血液即自行流人接收瓶内。瓶中先适量加些抗凝剂(茶硷和咖啡因——注射用品),浓度为0.02摩尔/升的3%氯化钠溶液,用0.05摩尔/升的三羟甲基氨基甲烷一盐酸缓冲液调至pH7.2左右,均需无菌无热原条件下制备。轻微震摇混合,当流人血量达到1:1时即可,为保证饲养鲎长期存活,每次每只鲎抽血80—100毫升,每年能抽4—8次www.nazashop.com/。
3.鲎血细胞的分离洗涤
可用下列两种方法处理:
其一,与抗凝剂混合的鲎血,低温(10C左右)静置48小时,使鲎变形细胞自动沉降,将血浆弃除,用洗涤液洗3次(洗涤液配制:3%氯化钠溶液,用0.1N的氢氧化钠液调整pH值至8,在无菌无热原下制备)。根据收集的变形细胞体积,按1:3比例加人0.9%氯化钠注射液,用无菌操作将变形细胞研磨2小时,再把细胞液置冰箱中崩解24小时,离心分取细胞溶解物。
其二,把与抗凝剂混合的鲎血,用离心机以1000转/分的速度离心10分钟,抽弃上层清液,加入30毫升洗涤剂,使血细胞混悬。把混悬液离心洗涤,抽弃洗涤液,剩下鲎的血细胞,按l:3体积比例加入无菌无热原的蒸馏水(pH7.2),剧烈振摇,置冰箱中48小时,离心分取细胞溶解物。
4.溶解物的制备
取2份体积分析纯的氯仿和1份体积的鲎血细胞溶解物混合,冰冻冷却,时时振摇,2小时后转移到经热原处理的分液漏斗内,分出细胞溶解物。按其体积每100毫升加入l摩尔/升氯化钙,1摩尔/升硫酸镁,3%氯化钠溶液3—5毫升,使含钙和镁量达到0.03—0.05摩尔/升,分装冷冻干燥,即为鲎试剂的成品。
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